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循環腫瘤細胞儀分(fēn)離(lí)CTC技(jì)術(shù)發展概述

發表日(rì)期:2021-03-15 10:44文(wén)章(zhāng)編輯:國(guó)初科(kē)技(jì)浏覽次數(shù): 标簽:    

據搜狐新聞網2月(yuè)6日(rì)訊:近(jìn)年(nián)來(lái),惡性腫瘤已經成為(wèi)全球範圍內(nèi)嚴重危害人(rén)類健>康及生(shēng)命的(de)重大(dà)疾病之一(yī)。腫瘤發生(shēng)時(shí),多(duō)為(wèi)器(qì)官局限性疾病,但(dàn)最終都(dōu)會(huì)通(£tōng)過血液轉移到(dào)其他(tā)器(qì)官,形成腫瘤轉移竈,給腫瘤的(de)治療造成極大(dà)的(de)困難。腫瘤遠(yuǎn)處轉移的(de)發生(shēng)€包括局部浸潤、滲入血管、随血液循環系統轉移并在其中存活、移出血管、在新的(de)部位定居并增殖等幾個(gè)步驟。進入到(dàδo)血液循環系統的(de)腫瘤細胞被稱為(wèi)循環腫瘤細胞( circulating tumor cell,CTC),它是(sh®ì)腫瘤遠(yuǎn)處轉移能(néng)夠發生(shēng)的(de)必要(yào)前提。已有(yǒu)研究表明(míng)多( duō)種上(shàng)皮腫瘤都(dōu)會(huì)向循環系統中釋放(fàng)CTC,如(rú)↕乳腺癌、膀胱癌、前列腺癌、直腸癌、宮頸癌和(hé)胰腺癌等。

 

從(cóng)腫瘤病竈脫離(lí)并播散到(dào)血液中的(de)腫瘤細胞,數(shù)量極少(shǎo),1mL血液中,大(dà)約有(yǒu)5,000σ,000,000個(gè)血細胞,而CTC的(de)含量往往隻有(yǒu)1-50個(gè)。CTC提示體(tǐ)內(n♣èi)腫瘤的(de)存在,是(shì)腫瘤轉移的(de)重要(yào)途徑,具有(yǒu)腫瘤病竈分(fēn)子(zǐ)信息。低(dī)損傷、高(gā™o)效、準确富集CTC對(duì)于提升腫瘤病人(rén)生(shēng)存率具有(yǒu)至關重要(yào)的(de)意義。CTC的(αde)富集方法可(kě)以分(fēn)為(wèi)生(shēng)物(wù)化(huà)學特性富集法(親和(hé)性富集法)和(hé‌)物(wù)理(lǐ)特性富集法。親和(hé)性富集法主要(yào)是(shì)根據通(tōng)過細胞表面特異性表達的(de)蛋白(bái)質生(shēng)物(wù)标志↕(zhì)物(wù)分(fēn)離(lí)靶細胞,包括正向捕獲CTC的(de)陽性富集法和(hé)負向去(qù)除白(bái)細胞的(de) 陰性富集法。物(wù)理(lǐ)特性富集法主要(yào)是(shì)根據CTC的(de)大(dà)小(xiǎo)、密度、力學和(hé)介電(diàn)性能(néng₩)等物(wù)理(lǐ)特性将CTC篩選出來(lái)。

從(cóng)發展曆程來(lái)看(kàn),循環腫瘤細胞儀分(fēn)離(lí)CTC技(jì)術(shù)分(φfēn)為(wèi)四代。

第一(yī)代為(wèi)基于物(wù)理(lǐ)特性的(de)粗分(fēn)離(lí)技(jì)術(shù)。基于物(wù)理(lǐ)特性的(de)粗分(fēn)離(lí)技(jì)術♦(shù)通(tōng)過特殊濾膜裝置、密度梯度離(lí)心将CTC分(fēn)離(lí)出來(lái)。這(zhè)些(xiē)技(jì)術(shù)操作(zuò)簡單成本低(dī)廉,不(b∑ù)依賴細胞表面抗原的(de)表達,捕獲的(de)細胞數(shù)量多(duō),但(dàn)是(shì)由于CTC物(wù)理(lǐ)特性的(de)異質性,難以富集到(dào)高(gāo)純<度的(de)CTC。

第二代為(wèi)基于生(shēng)化(huà)特性的(de)免疫磁珠技(jì)術(shù)。基于生(shēng)化(huà)特性的(de)免疫磁珠技≥(jì)術(shù)通(tōng)過免疫磁珠偶聯的(de)抗體(tǐ)或多(duō)肽正向或負向篩選出CTC。由于技(jì)術(shù)的(de)限制(zhì),早期的∞(de)磁珠隻能(néng)達到(dào)微(wēi)米級。随著(zhe)納米技(jì)術(shù)的(de)發展,現(xiàn)在使用(yòng) 的(de)磁珠大(dà)都(dōu)為(wèi)納米級,其增大(dà)的(de)比表面積增加了(le)與待測細胞的(de)接觸幾率,更好(hǎo)的(de)分(fē"n)散性降低(dī)了(le)對(duì)細胞造成的(de)機(jī)械性壓力,大(dà)大(dà)提高(gāo)了(le)C'TC的(de)富集率。CellSearch是(shì)全球目前唯一(yī)同時(shí)經過FDA和(hé)CFDA批準的(de)用(yαòng)于CTC檢測的(de)商業(yè)化(huà)産品。該産品由于檢測靈敏度不(bù)高(gāo),且無法分(fēn)離(lí)活體(tǐ↕)CTC,2016年(nián)初已停産。

第三代為(wèi)膜過濾或芯片過濾法。用(yòng)特定孔徑的(de)膜進行(xíng)CTC與正常≈細胞的(de)分(fēn)離(lí),其簡單地(dì)定義了(le)CTC是(shì)大(dà)細胞,漏檢小(xiǎo)粒徑腫瘤細胞尤其是(shì)腫瘤幹細∏胞,而為(wèi)了(le)提高(gāo)捕獲效率,則會(huì)殘留大(dà)量的(de)背景細胞,對(duì)鑒定造成較大(dà)'的(de)難度。

第四代為(wèi)微(wēi)流控芯片法。根據腫瘤細胞的(de)病理(lǐ)學定義—核質比顯著高(gāo)于正常細胞,采用(yòng)基于細胞剛性程度、尺寸等物(wù)理(lǐ←)特性的(de)微(wēi)流控芯片法。基于細胞大(dà)小(xiǎo)和(hé)變形性差異分(fēn)選CTC的(de)優勢在于:操作(zuò)過程簡單,捕獲效率高(gāo),能(Ωnéng)夠實現(xiàn)高(gāo)通(tōng)量富集,成本遠(yuǎn)遠(yuǎn)低(dī)于CellSearch,無需依賴表面标志(€zhì)物(wù),分(fēn)選出的(de)CTC可(kě)以用(yòng)多(duō)種抗體(tǐ)進行(xíng)标志(zhì)物(wù)鑒别。基于細胞力✔學性質差異分(fēn)選同基于細胞大(dà)小(xiǎo)和(hé)變形性差異分(fēn)選一(yī)樣,裝置簡單、無需複雜(zá)的(de)實驗設備、成本低(dī<)。樣品無需标記,不(bù)影(yǐng)響CTC分(fēn)子(zǐ)特性和(hé)表面标志(zhì)物(wù);細胞在微(wēi)流環境中損傷小÷(xiǎo),分(fēn)選後細胞的(de)存活率更高(gāo),可(kě)繼續培養和(hé)做(zuò)後續分(fēn)析。

目前國(guó)初科(kē)技(jì)(廈門(mén))有(yǒu)限公司提供的(de)第四代微(wēi)流控芯片技↑(jì)術(shù)的(de)循環腫瘤細胞儀用(yòng)于CTC的(de)分(fēn)離(lí),創新地(dì)實現(xiàn)了(le)非抗體(tǐ)依賴的(de)CTC​活性細胞無損捕獲,最大(dà)限度捕獲上(shàng)皮來(lái)源、間(jiān)質來(lái)源以及幹細胞來(lái)源所有(yǒu)表γ型循環腫瘤細胞。在非小(xiǎo)細胞肺癌細胞、結直腸腺癌細胞、宮頸癌細胞、胃癌細胞、肝癌細胞、乳腺癌細胞的(de)實£際分(fēn)選案例中,循環腫瘤細胞回收率可(kě)達95%以上(shàng),白(bái)細胞、紅(hóng)細胞去(qù)除率9 9%以上(shàng)。第四代循環腫瘤細胞分(fēn)選儀将開(kāi)啓腫瘤單細胞分(fēn)析新紀元。可(kě)實時(shí)動态檢測循環腫瘤細₽胞,作(zuò)為(wèi)組織活檢的(de)延展及補充,助力腫瘤精準化(huà)、個(gè)體(t↕ǐ)化(huà)治療。

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